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樹脂包埋(透射電鏡)

簡要描述:樹脂包埋(透射電鏡)實(shí)驗(yàn)步驟:1、取材:電鏡取材非常嚴(yán)格,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中;取材組織塊要小,一般要求將組織切成1立方毫米大?。蝗〔牟课灰獪?zhǔn)確、取材溫度要低是在4℃條件下進(jìn)行;取材工具要干凈,鋒利。如果是貼壁細(xì)胞不可用酶消化下來,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細(xì)胞,離心,細(xì)胞體積保證綠豆大小即可,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。

  • 產(chǎn)品型號:茁彩生物
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-08-31
  • 訪  問  量:1995
詳情介紹


樹脂包埋(透射電鏡)

樹脂包埋(透射電鏡)

樹脂包埋實(shí)驗(yàn)步驟:

1、取材:電鏡取材非常嚴(yán)格,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中;取材組織塊要小,一般要求將組織切成1立方毫米大??;取材部位要準(zhǔn)確、取材溫度要低是在4℃條件下進(jìn)行;取材工具要干凈,鋒利。如果是貼壁細(xì)胞不可用酶消化下來,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細(xì)胞,離心,細(xì)胞體積保證綠豆大小即可,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。

2、固定:取材后要及時固定,組織、細(xì)胞、蛋白等固定選用2.5%中性戊二醛固定液,植物等標(biāo)本則需要選用多聚甲醛和戊二醛的混合固定液。室溫固定兩小時左右后,放入4℃保存運(yùn)輸(如果是植物或者肺組織,則需要進(jìn)行真空抽氣固定,一般需要抽氣固定24小時左右,直至標(biāo)本*沉入容器底部)。

3、鋨酸后固定:將標(biāo)本從固定液中取出,用0.1mol/L的PB清洗并過夜,第二天轉(zhuǎn)入1%鋨酸后固定,固定時間普通標(biāo)本2h左右,植物標(biāo)本8至12h左右。

4、脫水:鋨酸固定后的標(biāo)本用用0.1mol/L的PB清洗后使用梯度乙醇脫水,濃度依次是50%、70%、80%、90%、95%、100%,植物標(biāo)本則會在50%乙醇前面再增加一個30%乙醇梯度,脫水時間普通標(biāo)本為10~15min,植物標(biāo)本脫水時間為1~1.5h4、浸透:用丙酮作為乙醇和樹脂間的過度溶劑,從純丙酮開始,中間經(jīng)過丙酮和樹脂的混合劑,混合比例丙酮從高到低到純樹脂,整個浸透過程需要1~2天完成。

5、包埋:先將組織對應(yīng)的標(biāo)簽放包埋板中,然后加入樹脂,再將浸透好的樣本放入包埋板中,調(diào)整好包埋面,然后放入恒溫箱內(nèi)熟化,熟化過程需要2~3天。熟化完成后,樣本樹脂包埋完成。


上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實(shí)驗(yàn),樣本不僅含有基礎(chǔ)的動物組織切片,還包括植物葉片、動物細(xì)胞、骨片、腦片、皮膚等特殊樣本。染色種類多,染色方法全.石蠟染色,冰切染色均可操作,同時還可以承接整體實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,包括樣本的造模,細(xì)胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細(xì)胞的增殖、細(xì)胞粘附、細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn).






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