發(fā)布時(shí)間: 2023-02-09 點(diǎn)擊次數(shù): 822次
無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一種用于保存細(xì)胞的液體,它不含血清,但含有一定濃度的糖、鹽和蛋白質(zhì),以及一定濃度的抗凍劑,可以有效地防止細(xì)胞凍傷,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。配方成分明確,不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液對(duì)細(xì)胞凍存步驟:
1、常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。
2、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。
3、將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄去離心管中的上清液。
4、加入適量的細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度約為5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞混合液。
5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中,建議每管1ml或1.5ml。
6、直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長(zhǎng)期冷凍保存。
7、如果想液氮中長(zhǎng)期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間,方可移至液氮罐中保存。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液用途如下:
1、用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存。
2、用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲(chǔ)。
3、用于其他類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存。